Dépistage de stupéfiants dans les cheveux par technique ELISA et confirmation, par GC-MS (2006)

Résumé de la communication présentée au XIVème congrès annuel de la Société Française de Toxicologie Analytique, Le Touquet, 7-9 juin 2006. L'objectif de l'étude est de valider un test immunochimique (ELISA One-Step°, International Diagnostic Systems Corp.) pour la recherche de stupéfiants (cannabis, amphétamines, cocaïne et opiacés) dans les cheveux. Les cheveux sont préalablement décontaminés par deux bains successifs de dichlorométhane et homogénéisés dans un broyeur. Pour le test de dépistage ELISA, 50 mg de poudre de cheveux sont incubés dans un mélange "diluant échantillon et standard"(fourni avec le kit) : méthanol (2:1,v/v), deux heures au bain ultra-sons ou 16h à 40°C. Après centrifugation de l'homogénat, 20uL du surnageant sont déposés dans un puits dont le fond est recouvert d'anticorps à forte affinité pour le stupéfiant ciblé. Après addition du conjugué enzymatique et incubation (30 min à température ambiante), le puits est lavé pour éliminer tout produit non lié avant l'étape finale de révélation par le substrat. L'intensité de la coloration, mesurée avec un lecteur de microplaques (450 ou 650 nm), est inversement proportionnelle à la quantité de stupéfiant présente dans l'échantillon. Pour la technique de confirmation (GC/MS), des procédures internes validées et publiées pour chaque stupéfiant ont été utilisées. Compte tenu des résultats, les kits ELISA ont montré des performances suffisantes en terme de sensibilité et de spécificité pour le dépistage de stupéfiants dans les cheveux. Une telle application pourrait se révéler intéressante dans le cadre d'un dépistage à l'embauche où le suivi de salariés ayant un poste à risque, en particulier lorsque le nombre attendu d'échantillons négatifs est élevé. De plus, un grand nombre d'échantillons peut ainsi être analysé dans la journée.